Filial de la Basílica de San Juan de Letrán en Roma, fue consagrada el 25 de marzo de 1859. Se ubica sobre uno de los laterales de la Plaza Francisco Ramírez. Hoy es un Monumento Histórico Nacional y entre las reliquias que atesoran se encuentran imágenes como la Purísima -talla de fin de siglo-, San Sebastián, Santa Rita de Casia- una talla en madera negra hecha por los jesuitas -, y Jesucristo Crucificado, entre otros. En el ala izquierda junto al altar mayor se encuentra el Mausoleo con el féretro que guarda los restos del General Justo José de Urquiza, realizado por el Sr. Luis Gonzaga Cerrudo, el cual guarda características similares al Mausoleo de Napoleón y al de San Martín. Cuenta la historia que los restos estuvieron casi cien años en el interior de una pared en el sótano de la Basílica, hasta ser descubiertos en 1950. Fueron hallados al azar cuando se buscaban los restos de Ana y Juan, hermanos de Urquiza. 

Colegio fundado por el Gral. Urquiza el 29 de julio de 1849, fue el primer colegio laico del país. El histórico edificio fue habilitado en el año 1851. En 1942 fue declarado Monumento Histórico Nacional. Con motivo de sus 150 años, se reformó y habilitó el museo histórico evocativo del Colegio.
En sus aulas estudiaron jóvenes que más tarde protagonizaron papeles cruciales en la historia de nuestro país: Julio Argentino Roca; Victorino de la Plaza y Arturo Frondizi, además de poetas como Olegario Víctor Andrade y Eduardo Wilde.

Este edificio fué comenzado a construir en 1848, en lo que fuera el primer puerto de la ciudad, y allí funcionaron las oficinas de la Aduana. Durante la primera mitad del siglo XX fué ocupado por el Ministerio de Obras Públicas y desde 1970 es sede de la Universidad Tecnológica Nacional.